β-gal染色

β-gal染色是用來(lái)對(duì)骨組織染色的一種染色方法，它一種是細(xì)胞溶酶體中的水解酶，能把乳糖水解成葡萄糖和半乳糖的酶。

絕大多數(shù)正常細(xì)胞被認(rèn)為僅有有限的分裂能力，在不能分裂后就進(jìn)入衰老（senescence）狀態(tài)。此時(shí)細(xì)胞仍然是存活的，但細(xì)胞的基因和蛋白的表達(dá)譜發(fā)生了很大改變。衰老（senescence）的細(xì)胞不能在一些常規(guī)的刺激下再誘導(dǎo)細(xì)胞分裂，并且衰老細(xì)胞的細(xì)胞周期分布也比較特殊，不同于一些損傷誘導(dǎo)的細(xì)胞休眠，也不同于細(xì)胞生長(zhǎng)接觸抑制的情況。衰老細(xì)胞細(xì)胞通常體積變大，表達(dá)pH 6.0時(shí)有高酶活性的β-半乳糖苷酶

β-gal染色試劑盒（β- Galactosidase Staining Kit是一種基于衰老時(shí)SA-阝Gal（ senescence- associatedβ- galactosidase）活性水平上調(diào)而對(duì)衰老細(xì)胞或組織進(jìn)行染色檢測(cè)的試劑盒。β-半乳糖苷酶染色試劑盒以Ⅹ-Ga為底物，在衰老特異性的β-半乳糖苷酶催化下會(huì)生成深藍(lán)色產(chǎn)物，光學(xué)顯微鏡下很容易觀(guān)察到變成藍(lán)色的表達(dá)β-半乳糖苷酶的細(xì)胞或組織。對(duì)于組織切片或組織塊，可以檢測(cè)的樣品數(shù)量視樣品的大小而定，對(duì)于普通的切片也至少足夠檢測(cè)100個(gè)樣品，使用6孔板測(cè)定，足夠測(cè)定100個(gè)樣品。

注意事項(xiàng)

1、β-半乳糖苷酧染色固定液有_定的腐蝕性和毒性，操作時(shí)請(qǐng)注意防護(hù)

2、β-半乳糖苷酶染色反應(yīng)依賴(lài)于特定的pH條件，不能在二氧化碳培養(yǎng)箱中進(jìn)行染色反應(yīng)。用于細(xì)胞培養(yǎng)的二氧化碳培養(yǎng)箱中較高濃度的二氧化碳會(huì)影響染色工作液的pH值，而導(dǎo)致染色失敗。

3、β-半乳糖苷酶染色液B在剛剛?cè)芙夂髸?huì)觀(guān)察到有沉淀，屬正常現(xiàn)象，充分混勻或Ⅴ ortex后，沉淀會(huì)全部溶解。作為常規(guī)，試劑使用前必須確保沉淀全部溶解，并且混勻。

4、配制染色工作液時(shí)需使用聚丙烯（φ polypropylene）容器或玻璃容器，不宜使用聚苯乙烯（ polystyrene）容器。但染色時(shí)可以在聚苯乙烯（ polystyrene）容器中進(jìn)行，例如普通的6孔板就可以用作染色的容器需自備PBS或HBSS（ Hanks balanced salt solution

注：為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。

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