蘇木素染色液

蘇木素染色液染色后細胞核呈藍色。本染色液可以和免疫熒光染色或免疫組化染色配合使用。一方面可以在本蘇木素染色液染色后進行免疫熒光染色或其它染料的染色，另一方面也可以在免疫組化染色后再進行蘇木素復(fù)染。本染色液可以重復(fù)使用，直至認為效果不佳時再換用新的染色液。一個包裝的本染色液至少可以染色200個樣品。

蘇木素染色液使用說明：

1. 樣品處理

a) 對于石蠟切片：

二甲苯中脫蠟5-10分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再脫蠟5-10分鐘。

無水乙醇5分鐘。

90%乙醇2分鐘。

70%乙醇2分鐘。

蒸餾水2分鐘。

b) 對于冰凍切片：

蒸餾水2分鐘。

c) 對于培養(yǎng)細胞：

用4%多聚甲醛固定10分鐘以上。

蒸餾水洗滌2分鐘。

換用新鮮的蒸餾水，再洗滌2分鐘。

2. 蘇木素染色

對于上述處理好的樣品：蘇木素染色液染色5-10分鐘(可以根據(jù)染色結(jié)果和要求調(diào)整時間)。

浸自來水中沖洗去多余的染色液，約10分鐘。

蒸餾水再洗滌一遍(數(shù)秒鐘)。

95%乙醇5秒。

此時，如果需要直接觀察，可以用70%乙醇洗滌2次。如需脫水、透明后封片按后續(xù)步驟進行，70%乙醇洗滌后仍可按照后續(xù)步驟進行脫水、透明和封片處理。

注：如果用于免疫組化等染色后的復(fù)染，可以參考上述步驟在其它染色完成后直接進行蘇木素染

色。

3. 脫水、透明、封片或進行其它染色

a) 脫水、透明、封片：

95%乙醇脫水2分鐘。

換用新鮮的95%乙醇再脫水2分鐘。

二甲苯透明5分鐘。

換用新鮮的二甲苯，再透明5分鐘。

用中性樹膠或其它封片劑封片。

顯微鏡下觀察，細胞核呈藍色。

b) 進行其它染色：

如果進行免疫熒光染色，或進行Hoechst等熒光染料的染色，在

蘇木素染色液染色后：

70％乙醇洗滌2次，每次2分鐘。

PBS或生理鹽水或TBS或TBST等用于免疫染色或熒光染料染色的溶液浸泡5分鐘。

然后就可以進行免疫熒光染色或其它熒光染料的染色了。

保存條件：

室溫避光保存，至少一年有效。

注意事項：

需自備4%多聚甲醛、70%乙醇和95%乙醇。如果需要脫水、透明和封片處理，還需自備二甲苯，中性樹膠或其它封片劑。如果樣品是石蠟切片，需自備90%乙醇，無水乙醇以及二甲苯。

染色液可以重復(fù)使用多次，認為效果不佳時再更換新的染色液。

使用本試劑盒時建議先取1-2個樣品做預(yù)實驗。

為了您的安全和健康，請穿實驗服并戴一次性手套操作。

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